作者：王廣 

單位：南華大學附屬第二醫院檢驗科

丙肝抗體檢測在丙型肝炎的篩查、診斷及治療過程中起著重要的依據作用。臨床上用于丙肝抗體檢測的方法主要有酶聯免疫吸附試驗(ELISA)、化學發光法以及快速檢測金標法，三者結果的一致性基本是符合的。但是在檢驗工作中，偶爾會出現結果不一致的情況，給檢驗人員的工作及臨床醫生的判斷帶來一定的疑惑性。

筆者這幾天剛好遇到了這種情況，甚至還引起了糾紛。還好在科室老師的共同努力下，順利解決了。

案例經過

患者為55歲男性，因“腹痛10小時”入院，20余年前因胃出血行“胃部分切除術”。否認冠心病、糖尿病、高血壓等病史，否認肝炎、結核、傷寒等傳染病史及接觸史，無重大外傷史，無輸血史，否認藥物過敏史，既往用藥史不詳，預防接種史不詳。具體檢查結果如下：

• 體格檢查

T 36.0℃、P 58次/分、R 18次/分、BP 96/71mmHg。腹膨隆，未見胃腸型及蠕動波，腹壁靜脈無曲張，腹部壓痛，無反跳痛，墨菲氏征陰性，肝脾肋下未捫及，肝區及雙腎區無叩痛，移動性濁音陰性，腸鳴音4次/分。

• 輔助資料（2023年6月29日 我院）

血常規：中性細胞數 13.7x109/L、白細胞 16.51x109/L。腹盆部CT：中腹部小腸腸管局部擴張，原因待查：糞石梗阻？其它待排，建議進一步檢查；肝多發低密度影性質待定，建議上腹部CT增強掃描；脂肪肝。心電圖：竇性心動過緩。

• 診治經過

入院后完善相關檢查。血常規：中性細胞數 15.7x109/L、白細胞 17.76x109/L；肝功、腎功、電解質：總膽紅素 22.50μmol/L、谷丙轉氨酶 69.0U/L、尿素 12.95mmol/L、尿酸 489umol/L、腎小球濾過率 65.5ml/min、間接膽紅素 16.20umol/L；CRP 21.24mg/L，凝血功能未見異常。

肺部CT＋全腹增強CT：小腸低位機械性腸梗阻：梗阻點位于右上腹，多為糞石性梗阻；肝多發囊腫，脂肪肝；雙肺散在微小結節，擬LU-RADS 2類，建議年度復查；右肺中葉內側段、左肺上葉舌段、雙肺下葉慢性炎癥。入院后予以口服潤腸藥、胃腸減壓、護胃、清潔灌腸、營養支持治療。

• 出院診斷

小腸垚石性腸梗阻；肝多發囊腫；脂肪肝；胃部分切除術后。

6月29日，患者急診檢查肝功能，結果顯示ALT增高：

6月30日，患者進行常規傳染病項目檢查，發現丙肝抗體陽性：

7月8日，患者在門診進行肝癌腫瘤標志物AFP、HCV-RNA定量及HCV基因分型檢測，結果都顯示陰性：

7月14日，患者復查HCV抗體檢測，采用化學發光法，結果提示陰性：

病人因腹痛住院，診斷為腸梗阻，期間常規傳染病檢查，發現丙肝抗體陽性、肝功能ALT輕度增高，提示肝損。臨床考慮丙肝病毒感染導致？但是病史不支持。且肝功能只有ALT輕微增高，存在脂肪肝，需要考慮脂肪肝也會引起ALT增高，故未特殊處理，建議隨訪復查。

隨后在門診檢測HCV-RNA定量及丙肝基因分型，檢測結果都顯示陰性；重新復查HCV抗體，結果也為陰性。

丙肝抗體結果前后一陽一陰，醫生看到結果也有點疑惑，懷疑住院那次的檢測結果存在誤差，建議患者來檢驗科咨詢確認。7月17日，病人家屬來到檢驗科窗口，質問兩次的丙肝抗體結果為什么不一致，懷疑住院那一次的檢查結果存在檢測錯誤，要求給出合理解釋。

問題反饋到免疫室組長那里，免疫室組長接到投訴后，立即進行處理。

6月30日的標本因為超過存放時間，已被處理；只能把7月14日的標本重新復查。用ELISA法跟化學發光法同時復查，結果顯示ELISA法為弱陽性，化學發光法為陰性，當天的質控都在控。免疫室老師也反應，其實住院那一次的ELISA方法檢測結果也是弱陽性，當時使用金標試紙條復查也是弱陽性結果。但是由于LIS系統的不完善，結果選項只有陰性跟陽性，故無法選擇弱陽性。

ELISA第一次檢測S/CO為1.3（S/CO>1判定為陽性），第二次S/CO為1.4；化學發光法S/CO為0.70，復查為0.76。為了排除實驗室誤差，聯系市內另外一家三甲醫院，讓幫忙同時用ELISA法跟化學發光法檢測HCV抗體，結果如下：

外院ELISA法、化學發光法檢測結果都與本院的一致，可排除實驗室操作誤差。

考慮到ELISA法為弱陽性，是否存在干擾物質，導致出現假陽性？常見的干擾物質如RF因子以及高濃度的免疫球蛋白、一些自身抗體等，給病人加做這兩項，結果顯示陰性，但是也不能排除。

綜合以上信息，與免疫室老師進行討論，查閱相關文獻資料，一致認為病人未感染HCV病毒，ELISA方法可能為假陽性，存在某種物質干擾檢測，但是無法確定為哪種物質。

病人第一次質疑時，聽不進老師的解釋，投訴到市政府熱線，隨后反饋到科室。第三天，病人家屬來到科里，在免疫室組長以及筆者的解釋下，病人家屬終于放下心中的擔憂，表示接受，撤銷投訴，事情終于告一段落。

好巧不巧，筆者隔天又遇到一例產科的孕產婦輸血前檢查。采用的是化學發光法，丙肝抗體為陽性，S/CO為2.6，復查結果依然一樣（在HCV抗體檢測過程中，偶爾會出現因為離心不充分、血清中存在纖維蛋白凝塊，導致出現低值假陽性，重新充分離心后檢測變為陰性的情況，故重新離心復查是有必要的。此次標本為隔夜標本，且充分離心后，復查結果依然一樣，可排除這種情況。）。

查詢到病人3月份在本院的產檢報告，HCV抗體為陰性（ELISA法檢測），金標試紙條復查為弱陽性。面對這種情況，筆者聯系了病人的管床醫生，說明情況，建議加做HCV-RNA定量，結果顯示為陰性。結合臨床癥狀跟病史，考慮化學發光法為假陽性。

• 文獻資料方面

在丙肝抗體檢測的方法學中，化學發光法的特異性與敏感性都要優于ELISA法。在用化學發光法和ELISA法同時篩查丙肝抗體時，用HCV-RNA定量作為確認實驗。

HCV抗體弱陽性樣本，ELISA法只有68%左右的符合率，而化學發光法有92%的符合率[1-2]，意味著在弱陽性的情況下，ELISA法的假陽性率比化學發光法高。

上文的情況與文獻中的研究相符，但兩種方法都存在假陽性的情況。

HCV抗體的檢測（采用化學發光法或者ELISA法）可用于HCV感染的篩查，對于HCV抗體陽性者，應進一步檢測HCV-RNA，以確定是否為現癥感染。

一些自身免疫性疾病患者可出現HCV抗體假陽性；血液透析和免疫功能缺陷或合并HIV感染者可出現HCV抗體假陰性；急性丙型肝炎患者可因為處于窗口期出現HCV抗體陰性。

HCV-RNA檢測有助于確診這些患者是否存在HCV感染[3]，因此HCV-RNA在HCV感染的診斷中起著重要作用，尤其是對于感染初期、HCV抗體尚未產生以及低值假陽性的病人。

但是HCV-RNA檢測在HCV感染極早期，不同廠家的試劑之間存在差異性，也可存在假陽性、假陰性的情況。這種時候，檢驗人員要加強與臨床的溝通，檢測結果也應結合臨床癥狀、病史以及其他方面的檢查綜合判斷，必要時動態隨訪。

總結

臨床上對于HCV感染的篩查，常用ELISA方法和化學發光法。化學發光法的靈敏度和特異性都高于ELISA方法，在ELISA方法出現低值陽性時，可以采用化學發光法進行復查。同時最好跟臨床進行溝通，解釋原因，有條件的可以行補充實驗，或者動態復查。

【參考文獻】

[1]王燕,尹秋霞等，化學發光法和酶聯免疫法作為篩選試驗測定丙肝抗體的評價[J],標記免疫分析與臨床,2013 ,20(4),246-250

[2]曹佳淋,李偉強等，化學發光法和酶聯免疫法作為篩選試驗測定丙肝抗體的評價[J],中醫臨床研究2019，11（15），53-65

[3]中華醫學會肝病學分會 中華醫學會感染病學分會，丙型肝炎防治指南（2019年版）[J],中國病毒病雜志，2020，10（1），26-46